Ornamental Aquatics

fa کشت بافت تخمدان ماهی قرمز حوض Carassius auratus Ovary culture of Goldfish Carassius auratus عمومى General پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">در این تحقیق کشت اولیه وکشت های مجدد اول و دوم (ساب کالچر اول و ساب کالچر دوم) بافت تخمدان ماهی طلایی Carassius auratus به منظور ایجاد یک مدل آزمایشگاهی از سلول های تخمدان این گونه انجام شد. یک عدد ماهی قرمز به وزن 42 گرم و طول 7 سانتیمتر با پودر گل میخک (0.2g/lit) بی هوش شد و تخمدان آن از بدن خارج و در یک ظرف پتری حاوی 5 میلی لیتر محیط کشت L-15، استرپتومایسین سولفات (200ug/ml )، پنی سیلین پتاسیم جی (200iu/ml) و آمفوتریسین (5ug/ml )B منتقل شد. تخمک ها که در مرحله پیشرفته رسیدگی (مرحله IV)  بودند از تخمدان جدا شدند و تخمدان به وسیله یک سرنگ 5 میلی لیتری به تکه های کوچک تر تبدیل شد. تکه های کوچک بافت تخمدان در 5 میلی لیتر محیط کشت 15%، L-15 سرم  گوساله جنینی (FBS)، استرپتومایسین سولفات (100ug/ml )، پنی سیلین پتاسیم جی ( 100iu/ml) و آمفوتریسین (2.5ug/ml )B تحت دمای 25 درجه سانتیگراد کشت داده شدند.  بعد از گذشت  دو هفته و تشکیل مقدار کافی لایه سلولی بر روی کف فلاسک کشت، سلولها با محلول PBS حاوی آنتیبیوتیکها  شستشو شدند،  از کف فلاسک کشت سلول از طریق تیمار با Trypsin-EDTA (%25/.) جدا گردیدند و مجدداً در 5 میلی لیتر محیط کشت 15% ، L-15 سرم  گوساله جنینی (FBS)، استرپتومایسین سولفات (100ug/ml )، پنی سیلین پتاسیم جی (100ug/ml ) و آمفوتریسین  (2.5 ug/ml )B تحت دمای 25 درجه سانتیگراد کشت داده شدند. پس از تشکیل مقدار کافی لایه سلولی بر روی کف فلاسک کشت، در روز پانزدهم  همین مراحل برای انجام ساب کالچردوم نیز تکرار شد.  سلولهای حاصل از کشت اولیه و ساب کالچرهای اول و دوم بافت تخمدان ماهی قرمز همگی سلول های شبه فیبروبلاست (Fibroblast-like)  بودند.</div> <div style="text-align: justify;">In this study primary culture, subculture1 and subculture2 of ovarian tissue from goldfish was done to develop an in vitro system of ovarian cells in this species. A goldfish weighing 42g and 7 cm in length was anesthetized by Clove powder (0.2 g/lit) and its ovary was removed and put in a petri dish containing 5ml L-15 medium, Streptomycin sulphate (200 ug/ml), Penicillin G potassium (Gibco, 200 iu/ml) and Amphotericin B (5 ug/ml). The oocytes which were in advanced maturation stage (IV) were isolated from ovary and the ovary cut into small pieces (explants) by a 5ml syringe. The ovary explants cultivated in 5ml L-15 medium supplemented with 15% FBS, Streptomycin sulphate (100 ug/ml), Penicillin G potassium (Gibco, 100 iu/ml) and Amphotericin B (2.5 ug/ml) at  25°C. After two weeks when confluent monolayer formed on the bottom of the flask, the cells were washed with PBS containing antibiotics, dislodged by Trypsin-EDTA solution (0.25%) and cultured in 5ml of L-15 medium, FBS (15%), antibiotics at 25 °C (first subculture). After confluent monolayer formation, on the sixteenth day similar procedure was followed for the second subculture.The emerging cells from explants and two subcultures exhibited fibroblast-like cells.</div> <div style="text-align: justify;"></div> کشت تخمدان, ماهی قرمز, Carassius auratus Ovary culture, Goldfish, Carassius auratus 21 27 http://ornamentalaquatics.ir/browse.php?a_code=A-10-105-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Reza Nowruzfashkhami محمدرضا نوروزفشخامی Nowruzfashkhami@yahoo.com 10031947532846001308 10031947532846001308 Yes Agricultural Research, Education and Extension Organization تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی Mahmoud Bahmani محمود بهمنی mahmoudbahmani@ymail.com 10031947532846001309 10031947532846001309 No Agricultural Research, Education and Extension Organization تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی